化妝品中二苯酮-2的檢測方法適用范圍

本方法規定了采用高效液相色譜紫外法測定化妝品中二苯酮-2（CAS ：131-55-5）的方法。
本方法適用于衢州市瑞爾豐化工有限公司膏霜、乳、液、指甲油等化妝品中二苯酮-2含量的測定。暫無實驗數據支持本方法適用于粉類、蠟質類化妝品。

2方法提要
樣品經過提取后，經高效液相色譜分離，紫外檢測器測定，峰面積定量，以標準曲線法計算含量。本方法對二苯酮-2的檢出限為1.5µg，定量下限為5µg；若取0.1g樣品測定，二苯酮-2的檢出濃度為0.03%，最低定量濃度為0.1%。

3試劑和材料
3.1 乙腈，色譜純。
3.2 超純水。
3.3 二苯酮-2，純度≥97%。
3.4 二苯酮-2標準儲備液：準確稱取二苯酮-2 0.1g（準確至0.0001g），置100mL棕色量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻，得濃度為1000µg/mL的標準儲備液（1），取5mL，置50mL棕色量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，得100µg/mL的標準儲備液（2）。
3.5 二苯酮-2系列濃度標準工作溶液：用乙腈將上述儲備液（3.4）按下表配制二苯酮-2濃度為1 μg/mL、2 μg/mL、4 μg/mL、8 μg/mL、20 μg/mL、100 μg/mL、150 μg/mL的系列濃度標準工作溶液。
序號 儲備液 濃度μg/mL 量取體積mL 定容體積mL 標準溶液濃度μg/mL
1 儲備液1 1000 7.5 50 150
2 儲備液1 1000 5.0 50 100
3 儲備液1 1000 1.0 50 20
4 儲備液2 100 8.0 100 8
5 儲備液2 100 4.0 100 4
6 儲備液2 100 2.0 100 2
7 儲備液2 100 1.0 100 1

4儀器
4.1 高效液相色譜儀：具二元梯度泵，紫外檢測器。
4.2 分析天平：感量0.0001g。
4.3 高速離心機。
4.4 超聲波清洗儀。

5測定步驟
5.1 樣品處理
準確稱取樣品約0.1g，精確至0.0001g，置于50mL具塞比色管中，加乙腈：水（90：10）約45mL，超聲（功率：500W）處理30min；冷卻至室溫，用乙腈：水（90：10）加至刻度，搖勻，4500rpm離心30min。取上清液作為待測溶液。
5.2 色譜條件
色譜柱：C18, 250mm×4.6 mm，5μm；
檢測波長：335nm；
流速：1mL/min；
柱溫：30℃。
流動相：梯度程序見下表：
流動相的梯度程序
時間（min） 乙腈（%） 水（%）
0.003.0013.0029.0038.00 404010010040 60600060

進樣體積：10μL
5.3 測定
在5.2色譜條件下，取系列濃度標準工作溶液（3.5）、待測溶液（5.1）分別進樣，進行液相色譜分析，以二苯酮-2濃度（ρ，μg/mL）為橫坐標，二苯酮-2峰面積為縱坐標，進行線性回歸，建立標準曲線，得到回歸方程。利用回歸方程計算出待測溶液中二苯酮-2的質量濃度（ρ，μg/mL），按“6 計算”，計算樣品中二苯酮-2的含量。
5.4 平行實驗
按以上步驟操作，對同一樣品獨立進行測定獲得的兩次獨立測試結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。

6計算
ω（二苯酮-2）=ρ×V╱m×1000 ×100% 式中：ω（二苯酮-2）—— 樣品中二苯酮-2的含量，%；
ρ—— 待測溶液中二苯酮-2的質量濃度，μg/mL；
V—— 樣品定容體積，mL；
m—— 化妝品取樣量，mg。

7精密度與準確度
多家實驗室驗證的平均回收率為92.5%-108%，相對標準偏差小于7%（n=6）。

8色譜圖
二苯酮-2標準溶液（100mg/L）的高效液相色譜圖
色譜峰：二苯酮-2（TR=6.3min)