5-甲基尿苷液相檢測方法
1 試驗儀器、試劑
a) 試驗儀器：高效液相色譜儀（紫外檢測器）；
b) 記錄儀：色譜工作站；
c) 乙腈：色譜純；
d) 磷酸二氫鉀：分析純；
e) 磷酸：分析純。
2 試驗條件
a) 色譜柱：Agilent Extend-C18，250×4.6mm，5μm 或類似柱；
b) 檢測波長（UV）：254 nm；
c) 流動相：乙腈、0.01M KH2PO4溶液（用稀磷酸調 pH3.0）；
d) 梯度：
時間     乙腈     0.01M KH2PO4 (pH=3.0）
0             6            94
4             6            94
9             20          80
13           20          80
13.1         6           94
16            6           94
e) 流速：1.0mL/min；
f) 柱溫：30 ℃；
g) 進樣量：10μL；
h) 溶劑：乙腈–水（10:90）。
3 試驗準備
精密稱取40mg對照品于100ml容量瓶中，用溶劑溶解，定容至刻度，混勻，配制兩份；
精密稱取20mg供試品于50ml容量瓶中，用溶劑溶解，定容至刻度，混勻，配制兩份。
4 樣品分析
進樣溶劑，檢查基線飄移、噪聲等其他系統信號干擾。
樣品按下列次序進樣：
批號              溶液名稱           針次
對照品 第 1 份對照溶液         1
              第 2 份對照溶液         1
樣品 1  第 1 份供試溶液         1
              第 2 份供試溶液         1
樣品 2  第 1 份供試溶液         1
              第 2 份供試溶液         1
… …
技術指標9的測試方法文件對照溶液峰面積與稱量的比值A/W（Area/mg）的相對標準偏差RSD不得超過0.5%。
同一批供試溶液的2次進樣所得含量的相對標準偏差RSD不得超過0.5%。
5 色譜純度
按面積歸一法：總雜質=單個雜質之和。
6 含量
公式如下：
                           AS×WR×VS              100×PR
甲基尿苷（%）=-----------------------×--------------------
                                   AR×WS×VR               100-L

AS——供試溶液5-甲基尿苷的峰面積；
AR——對照溶液5-甲基尿苷的峰面積；
WR——配制對照溶液時，5-甲基尿苷對照品的稱量，mg；
WS——配制供試溶液時，5-甲基尿苷供試品的稱量，mg；
VS——配制供試溶液時，容量瓶的體積，ml；
VR——配制對照溶液時，容量瓶的體積，ml；
PR——5-甲基尿苷對照品的含量，%；
L——5-甲基尿苷供試品的實測干燥失重，%。