1、以cAMP為原料cAMP三乙胺鹽的制備投料比為cAMP(m)：0.4mol/L三乙胺(V)：無水吡啶(V)=1：7.2：5.3。在冷凍下將cAMP加入0.4mol/L三乙胺溶液中使其全部溶解，在室溫下抽去剩余的三乙胺(至無臭味或pH=9-9.5)，加熱在55℃下減壓濃縮，加無水吡啶脫水，55℃減壓蒸去無水吡啶，重復脫水和蒸餾一次，最后可得到海綿樣產物，干燥，得cAMP三乙胺鹽。
cAMP粗品[三乙胺，無水吡啶]→[pH9-9.5,55℃]cAMP三乙胺鹽雙丁酰環磷腺苷酸(DB-cAMP)的制備投料比為cAMP三乙胺鹽(m)：重蒸丁酐(V)：無水吡啶(V)：蒸餾水(V)=1：7.5：15：6.9。將cAMP三乙胺鹽和重蒸丁酐及無水吡啶混合后，在35-40℃下密閉恒溫反應6-7天(反應終點的測定可用下法：取反應液加等量蒸餾水，冰箱中放置4h后層析應呈單點，Rf=0.85左右)。
反應完成后，在10℃下緩慢加入蒸餾水水解，為促使水解反應完全可將水解液置于冰浴中放置2-3h。50℃以下減壓蒸餾，加乙醚溶解，用蒸餾水提取，水層在40℃以下減壓濃縮，再加乙醚溶解，抽去乙醚，加無水乙醇溶解成糖漿狀，得雙丁酰環磷腺苷酸。cAMP三乙胺鹽[重蒸丁酐]→[35-40℃,6-7d]雙丁酰環磷腺苷酸雙丁酰環磷腺苷酸鈣的制備投料比為cAMP(m)：無水氯化鈣(V)：無水乙醚(V)：無水乙醇(V)=1：0.26：9.5：1.1。
將上步驟中所得的雙丁酰環磷腺苷酸糖漿狀物中加入溶于蒸餾水(1.57倍)和乙醇(3.1倍)中的無水氯化鈣溶液，混勻后，室溫下減壓濃縮至干，加少量無水乙醚潤濕后再抽干，干燥過夜后加無水乙醇溶解成厚漿狀，冰浴下緩慢加入無水乙醚，抽濾，用無水乙醚洗滌，干燥，得雙丁酰環磷腺苷酸鈣成品。
雙丁酰環磷腺苷酸[氯化鈣、水、乙醇、無水乙醇、乙醚]→[濃縮、沉淀]雙丁酰環磷腺苷酸鈣。
2、以青霉菌菌體為原料提取、熱處理、沉淀將新鮮的青霉菌菌體加入三倍量的0.5%氫氧化鈉溶液中，8℃攪拌下提取2h，加6mol/L鹽酸調至pH7，迅速加熱至90℃保持10min，過濾，濾液冷卻，用6mol/L鹽酸調pH2.5，低溫靜置過夜，除去上清液，離心，收集沉淀，得核糖核酸粗品。
青霉菌菌體[氯化鈉，鹽酸]→[8℃,2h]提取液[6mol/L鹽酸]→[pH7,90-10℃]上清液[6mol/L鹽酸]→[pH2.5]精制品酶解、熱處理粗品加水溶解，配成1%的溶液，用稀氨水調Ph=5.6-6.2，攪拌下加熱至68-70℃，將酶液預熱至50℃，取一半與核酸液混合，63-65℃反應20min，再加另一半酶液，反應2h，加熱至95℃，保溫15min，使酶失活，冷至室溫，加6mol/L鹽酸調pH3，在10℃下靜置過夜，過濾，得5’-核苷酸粗制液。
粗制品[氨水，5’-磷酸二酯酶]→[pH5.6-6,63-65℃,20min]酸解液[6mol/L鹽酸]→[95℃,pH3,10℃]5'-核苷酸粗制液吸附、洗脫取粗制液加6mol/L氫氧化鈉中和至pH7.2，上711氯型陰離子交換樹脂柱，用蒸餾水沖洗后以3%的氯化鈉溶液洗脫，洗脫液從pH7開始收集，得5'-核苷酸鈉純化液。
5'-核苷酸粗制液[6mol/L氫氧化鈉，717樹脂]→[pH7.2]吸附物[3%氯化鈉]→[pH7]5'-核苷酸純化液制劑將純化液加0.5%-1%的活性炭，加熱至100℃，煮沸10min，冷卻過濾，收集濾液，再加0.5%-10%的活性炭，室溫下攪拌30min，過濾，收集濾液，得5'-核苷酸鈉精制液。
熱原、毒性、含量測定合格后，除菌、過濾、分裝、封口，制成5'-核苷酸鈉注射液。
5'核苷酸純化液[活性炭]→[100℃]5'-核苷酸鈉精制液[制劑]→5’-核苷酸鈉注射液以谷氨酸菌體為原料自溶、脫鹽谷氨酸發酵液離心后收集得濕的菌體，加等體積的水，與菌體混合成勻漿，投入碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液(重量比為碳酸鈉：碳酸氫鈉=2：1，pH=10)1000L中，不斷攪拌，控制pH9.5-10，溫度65-70℃，攪拌20min，加入處理好的16-50目732氫型陽離子交換樹脂進行脫鹽，pH下降到4.8-5.2時脫鹽完畢。靜置，使溶液與樹脂自然分層得自溶液。
谷氨酸菌濕菌體[水、碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液]→[pH9.5-10,65-70℃]上清液[732陽離子交換樹脂]→[pH4.8-5.2]脫鹽自溶液澄清、中和將自溶液加入鹽酸調pH3.5，使菌體沉淀，靜置1-2h，將上清液用氫氧化鈉調pH7-7.2，冷至40℃，得混合單核苷酸稀溶液。
脫鹽自溶液[鹽酸]→[pH3,5]上清液[氫氧化鈉]→[pH7-7.2]混合單核苷酸稀溶液吸附、洗脫、中和、濃縮稀溶液先上石英沙柱，再上717氯型陰離子交換樹脂柱，用5倍量的樹脂體積的蒸餾水洗滌，然后用0.2mol/L的鹽酸洗脫，當pH下降到3.5有鮮味時，開始收集洗脫液，至pH0.5時停止收集。洗脫液用氫氧化鈉溶液中和至pH6.5-7，減壓濃縮，過濾，得混合5'-核苷酸溶液。
混合單核苷酸稀溶液[717陽離子交換樹脂柱]→吸附[0.2鹽酸]→[pH3.5-0.5]洗脫液[氫氧化鈉]→[pH6.5-7]混合5’-核苷酸溶液。