2-羥基-6-萘甲酸及其雜質含量的液相色譜測定
1、儀器與試劑
島津LC-20AB HPLC儀，SPD-M20A PDA檢測器，島津LCsolution Ver1.X工作站，PHSJ-4A型酸度計 。
2-羥基-6-萘甲酸、2-羥基-3-萘甲酸、2-萘磺酸、1,4-萘二甲酸、2-羥基-6-萘甲酸甲酯，均為標準品，質量分數為99.5%；氫氧化鈉、甲醇，分析純；乙腈、四氫呋喃，色譜純。實驗所用水為試驗室二級用水（0.45μm濾膜抽濾）。
2、標準曲線的繪制
配置質量濃度分別為4000mg/L的2-羥基-6-萘甲酸、0.8mg/L的2-萘磺酸、20mg/L的1,4-萘二甲酸、40mg/L的2-羥基-6-萘甲酸甲酯、20mg/L的2-羥基-3-萘甲酸標準液，然后分別稀釋成不同的質量濃度，通過手動進樣，色譜工作站計算標準曲線。
3、試樣處理
稱取試樣約0.4克（精確到0.1mg）到100mL容量瓶中，用甲醇完全溶解后定容。
4、色譜條件
色譜柱為Aksail ODS 250mm×4.6mm×5μm；流動相：有機相為甲醇和乙腈以體積比4：1混合，水相為0.02mol/L KH2PO4/ H3PO4PH3.9的緩沖溶液，采用梯度洗脫。體積流量1.0mL/min，檢測波長220nm，柱溫40℃，進樣量4.0μL。
5、測定
在以上操作條件下，采用外標法進行色譜分析，分析結果由島津液相色譜工作站進行自動處理。
6、總結
以甲醇為溶劑，用ODS C18柱分離，以甲醇-乙腈（體積比4：1）和0.02mol/L的KH2PO4 （PH=3.9）為流動相進行梯度洗脫，能使被測的5個組分（2-羥基-6-萘甲酸、2-羥基-3-萘甲酸、2-萘磺酸、1，4-萘二甲酸、2-羥基-6-萘甲酸甲酯）完全分離，RSD分別為0.0004%、0.14%、0.23%、0.08%、0.11%，加標回收率為86.70%~100.5%，定量限、線性關系、精密度和加標回收率均能滿足定量分析要求。