制備：
1、異亞硝基乙酰對甲苯胺的合成
　　在三口燒瓶中依次加入一定量的無水硫酸鈉、33mL水和20mL水合氯醛水溶液，機械攪拌。緩慢滴加4.28g對甲苯胺與8mL濃鹽酸、67mL水的混合溶液，在此過程中溶液里有大量乳白色沉淀析出。繼續滴加8.90g鹽酸羥胺的40mL水溶液。溶液滴加完畢后，升溫至指定溫度反應一段時間，冷卻，抽濾，將濾餅水洗、干燥，稱重，測定熔點。

精制:將一次實驗所得6.90g粗產物溶于780mL1%的NaOH溶液中，過濾，將濾液用3mol/L的鹽酸中和，溶液中逐漸析出白色粉狀沉淀，調至pH值為6～7。抽濾，將濾餅水洗、干燥，稱重，得到6.14g，收率達到了86.3%

2、5-甲基靛紅的合成
　　一定量的濃硫酸加熱至60℃于20min內加入5.00g(精制)異亞硝基乙酰對甲苯胺，使溫度保持在60～70℃之間。加料完畢，升溫至指定溫度，保溫20min。冷卻至30℃以下，倒入100mL水中，水解30min，冰水浴冷卻至15℃以下，抽濾，用20mL×3的冰水洗滌，干燥，稱重。

3、2-氨基-5-甲基苯甲酸的合成
　　在100mL三口瓶中加入2.50gNaOH、20.0mL水，磁力攪拌，溶液冷卻至30℃以下，加入3.40g(21mmol)5-甲基靛紅，攪拌溶解，冰水浴冷卻至15℃以下，滴加7.0mL(67mmol)30%的H2O2，控制滴加速度，使溫度保持在15～20℃下，繼續攪拌0.5h，冰水浴冷卻下，繼續攪拌0.5h，冰水浴冷卻下，緩慢滴加2mol/L的鹽酸至pH5～6，濾集析出物，少量冰水洗滌，干燥得土黃色固體。兩次所得產物分別重2.90g和2.93g。前者的粗品經1∶1的乙醇水溶液重結晶，得到2.50g土黃色粉末，收率為81.3%。
 
質量指標：
外觀 淡黃色結晶
純度 ≥99%
熔點 174~177℃
水分 ≤0.3%
干燥 ≤0.5%
 
用途：  有機合成試劑，醫藥中間體。它是重要的醫藥化工中間體,可用于合成各種葉酸類似物，它還是抗癌藥物雷替曲塞(Raltitrexed)的起始原料，以其為原料合成的其它抗腫瘤藥物,例如CB3717、ICI198583、ZD9331等。

參考文獻:
1 (Ｓ)(＋)-2-乙氧基-4-[N-[1-(2-哌啶子基-苯基)-3-甲基-1-丁基[氨基羰基甲基]苯甲酸．含＊    中國專利  1991 專利號：CN-1068820|1991.07.22|1993.02.10| 
2 2-氨基-6-甲基苯甲酸的制備  張春華;楊果  化學世界  2004  (12),657-658,649