結構式
　　　　

CAS:39450-01-6
分子式:C29H27N2O12P
分子量:626.504641

中文名稱:蛋白酶K

英文名稱:Proteinase K

性質描述:蛋白酶K是一種從白色念珠菌分離出來的強力蛋白溶解酶，具有很高的比活性，是DNA提取的關鍵試劑。該酶在較廣的pH范圍（4?12.5)內及高溫(50?70°C)均有活性，用于質粒或基因組DNA、RNA的分離。蛋白酶K能消化天然的角蛋白（Kerati），而得名蛋白酶K。其主要的切割位點是脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。由于其廣泛地的切割能力，在實驗室中很常用。此蛋白酶屬于絲氨酸蛋白酶SB超家族中的S8家族（枯草桿菌蛋白酶也屬于這個超家族）。蛋白酶K的分子量為28.9千道爾頓。

酶活性:蛋白酶K的酶活力，>30U/mg。在37℃，以血紅蛋白為底物，1分鐘內可以產生相當于1微摩爾酪氨酸Folin陽性的氨基酸或多肽的蛋白酶K的量，定義為一個單位蛋白酶K酶活力。在很寬的pH范圍內有效，有效的pH范圍為pH4.0-12.5，最佳pH范圍為pH7.5-8.0。蛋白酶K的最佳反應溫度為65℃，但在65℃或更高的溫度蛋白酶K自身的也非常迅速地降解。很多時候反應溫度選擇50-55℃。

用途: 蛋白酶K由于能夠消化角蛋白（kratin）因此被命名為蛋白酶K。蛋白酶K家族包含了各種由真菌、酵母及革蘭氏陰性細菌分泌的細胞內肽酶，其中細菌分泌的酶有高度的序列相似性（>55%）。林伯氏白色念球菌（TritirachiumalbumLimber）分泌產生蛋白酶K是該家族的模式蛋白。

蛋白酶K對大多數底物均有切割活性，但是偏好于帶有脂肪族及芳香烴的肽鏈。其屬于絲氨酸蛋白酶，擁有典型的絲氨酸活性位點：Asp39–His69–Ser224。其含有一個單練肽鏈包含277氨基酸位點，并擁有2個二硫鍵和一個空置的半胱氨酸位點以及兩個鈣離子結合位點。

蛋白酶K的應用主要為核酸提取時去除DNA酶和RNA酶，并且可將結合于基因組上的組蛋白去除，還可用于堿性磷酸酶的失活。目前分子生物學技術已應用于許多檢測標準中，例如轉基因檢測、動物屬性檢測、致病微生物檢測等。在分子生物學檢測中核酸的提取質量直接影響了后續PCR反應的擴增效率。

許多標準在核酸提取步驟中都設立了添加蛋白酶K消化的步驟，以期提取較純的核酸。

    為了保護核酸，分子生物學核酸提取實驗中通常含有EDTA等試劑，由于EDTA可以與金屬離子絡合，因此可能會導致酶活性受到影響；并且通常為pH8.0時和55℃條件下進行消化，不同pH值和溫度條件會使得酶活性受到影響。