魯米諾-鐵氰化鉀化學發光法測定雙嘧達莫的研究

1.實驗條件的選擇

（1） 混合管道長度的選擇
實驗發現luminol-K3Fe(CN)6化學發光反應是一快速的化學發光反應，當泵1各管的流速為1.2ml/min，泵2各管的流速為1.7ml/min時， luminol與K3Fe(CN)6經過10 cm的混合管道混合后，二者的反應已很充分了，信噪比已足夠大。因此實驗選擇luminol與K3Fe(CN)6的混合管道長為10 cm。

（2） 反應介質及其濃度的選擇
實驗發現鐵氰化鉀氧化DIP與鐵氰化鉀氧化luminol的化學發光反應均在堿性介質中進行，本實驗以相同pH值（pH=10）的NaHCO3-NaOH、KH2PO4-NaOH、Na2B4O7-NaOH、Na2HPO4-NaOH等一系列緩沖溶液和NaOH、KOH溶液作為反應的介質，進行了選擇，實驗結果表明在NaOH的反應介質中發光信號最強且穩定，因此選用NaOH溶液作為反應的介質。我們又對NaOH溶液的濃度進行了選擇，如圖1-2所示，當NaOH的濃度在0.01~0.1mol/L的范圍時，信噪比隨著濃度的增大而增強，當NaOH的濃度大于0.1 mol/L時，信噪比隨著NaOH的濃度的增大而降低，因此本實驗選用0.1mol/L的氫氧化鈉溶液作為反應的介質。

（3）鐵氰化鉀濃度的選擇
K3Fe(CN)6為本發光體系的氧化劑，它在化學發光過程中起著很關鍵的作用，實驗詳細考察了它的濃度對DIP測定的影響，實驗結果如圖1-3所示。從圖可以看出，當K3Fe(CN)6濃度在0.1×10-4mol/L ~1×10-4 mol/L時，信噪比隨著K3Fe(CN)6的濃度增大而增大，當的K3Fe(CN)6濃度為1×10-4 mol/L時，信噪比最大，當K3Fe(CN)6的濃度大于1×10-4 mol/L時，信噪比隨著K3Fe(CN)6的濃度增大而減小，這可能是由于K3Fe(CN)6本身有顏色可以吸收光輻射的緣故。故本文選取K3Fe(CN)6的濃度為1×10-4 mol/L。

（4）魯米諾濃度選擇
在該體系中，魯米諾為化學發光試劑，其濃度對分析信號有很大的影響，實驗考察了魯米諾濃度對信噪比的影響，如圖1-4所示，魯米諾濃度在0.5×10-6 mol/L ~ 5×10-6 mol/L時，信噪比隨著魯米諾的濃度增大而增大，當魯米諾濃度等于5.0×10-6mol/L時信噪比最大，當魯米諾溶液的濃度大于5.0×10-6mol/L時，信噪比反而下降，所以本文選擇5.0×10-6mol/L的魯米諾溶液。

2.校準曲線、精密度及檢出限
在上述優化的實驗條件下，化學發光信號與DIP的濃度在1×10-10 ~ 4×10-7g/mL的范圍內成線性關系。為了提高方法的精密度和準確度，以及由于儀器條件所限，校準曲線分段繪制，其基本參數列于表1-1。根據IUPAC建議，計算得該方法的檢出限為6×10-11g/mL。對1×10-8g/mL的DIP進行7次平行測量，相對標準偏差為1.1%。該體系的分析效率為60 h-1

3.干擾實驗
固定DIP的濃度為1.0×10-8 g/mL，試驗了常見組分對該化學發光體系測定DIP的影響。結果表明，當實驗誤差小于5%時，允許存在的共存物的量為：1000倍β-環糊精、尿素、乙醇；500倍蔗糖、硬脂酸鎂、淀粉、葡萄糖、麥芽糖；100倍草酸、果糖；50倍檸檬酸、10倍尿酸，5倍抗壞血酸。

4.樣品分析
利用本法對DIP片劑中DIP含量進行了測定。取10片DIP片劑（標示量：25mg/tablet），準確稱量后，研細，混合均勻，從中取出相當于2片的粉末于燒杯中，加適量乙醇溶解后，過濾，濾液轉入100ml容量瓶中，用水定容，搖勻。吸 取一定量的該溶液，用水適當稀釋后，按圖1-1所示流路進行樣品分析，并與藥典中標準方法對照，沒有顯著性差異。