CAS：69-78-3
分子式：C14H8N2O8S2
分子量：396.34

中文名稱： 二硫代硝基苯甲酸
                      5,5'-二硫雙(2-硝基苯甲酸)

英文名稱：2,2'-dinitro-5,5'-dithiodibenzoesaeure
                    3,3'-dithiobis(6-nitrobenzoic acid)
                    DTNB

性質描述： 淡黃色至黃色粉末；微溶于乙酸和水。有刺激性。熔點240-245℃。

合成工藝：
1958年Ellman以Aldrich化學公司提供的5-氯-2-硝基苯甲醛為起始廈料,按下列路線合成DTNB:其第-步系用KMnO4。進行氧化反應;第二步用Na2S水溶液處理以便用琉基取代氯原子;第三步是用碘為氧化劑,通過氧化反應生成二硫化物即DTNB。通過研究改進該工藝。具體工藝如下：
 
5-溴-2-硝基甲苯的制備
   在裝有攪拌器、回流冷凝管和溫度計的250毫升三口燒瓶中, 加入0.2摩爾的間溴甲苯,預熱至50℃,在強烈地攪拌下由滴液漏斗往燒瓶中滴加混酸共27.95毫升。要調節水浴溫度和混酸滴入速度以使反應混合液溫度保持在50-55℃之間為宜。滴畢,繼續回流反應1.5小時。分出酸層,用甲苯35毫升分次萃取。萃取液與有機層合并。經水洗、干燥后用常壓蒸餾或用減壓蒸餾收取所需餾分。冷卻結晶、過濾、水洗、干燥后即得5-溴-2-硝基甲苯的制備。反應方程式如下：

5-溴-2-硝基苯甲酸的制備
    往250毫升三口圓底燒瓶中加入0.01摩爾5-溴-2-硝基甲苯和25毫升水。在攪拌下加熱至100℃后,用分液漏斗分批加入80毫升5%KMnO4水溶液。加熱以維持沸騰狀態直至紫色完全消失為止。趁熱過濾并用適量熱水洗滌MnO2沉淀。將濾液與洗液合并后加熱濃縮到30毫升左右,將澄清液體冷卻到室溫,加濃鹽酸酸化后即有白色沉淀析出。靜置,待結晶沉淀完全后,過濾、水洗、干燥即得粗品（5-溴-2-硝基苯甲酸），熔點138-140℃。反應方程式如下：
 
DTNB的合成
    50毫升三口梨形燒瓶中,加入0.8克5-嗅-2-硝基苯甲酸和20毫升水。再加少許NaOH溶液調整pH在3.8左右。用水浴加熱燒瓶至液溫達50℃,開動攪拌,用分液漏斗將Na2S水溶液4.4毫升從燒瓶側口很快地-次加入。加快攪拌并使反應溫度始終保持在50℃。約2小時后,反應混合物之顏色由黃變為橙紅色而不再變深時,則琉基化反應基本完成。逐滴加入碘的碘化鉀水溶液直至反應混合液顏色由橙紅變橙黃最后變為淺黃色為止。如有少量沉淀出現需要濾去。將濾液用濃鹽酸酸化(PH=1)即有油狀物首先出現,攪拌后成固體結晶狀物。靜置,待沉淀完全后,過濾、水洗、干燥即得粗制之DTNB的3克。為進-步提純,可用冰醋酸或二甲基甲酰胺重結晶。最后得黃色結晶產品0.24克。熔點236-237℃。

用途：巰基測定，是測定蛋白質、多肽和組織中巰基的靈敏試劑。也用于有機磷農藥中毒的監測（膽堿酯酶測定）。

參考文獻：
1 5,5’-二硫代雙(琥珀酰亞氨基-2-硝基苯甲酸)功能化的SERS納米探針在免疫檢驗中的應用 陳雷;薛向欣;崔運成;韓曉霞;徐蔚青 高等學校化學學報 2015-08-10 期刊
2 5,5′-二硫雙(2-硝基苯甲酸)構筑的鈷配合物的合成與晶體結構(英文) 張亞男; 黨蓓君; 海嘯; 劉俠 無機化學學報 2014-08-10 期刊
3 血紅蛋白存在下膽堿酯酶活性的5,5′-二硫雙-2-硝基苯甲酸分光光度測定法 李前; 劉偉; 李鳳珍; 孫曼霽 中國衛生檢驗雜志 2001-06-25 期刊 
4 茼麻子中巰基化合物的測定及對重金屬脅迫的應答作用研究 胡北 延邊大學 2015-05-21 碩士
5 血紅蛋白存在下膽堿酯酶活性的5,5′-二硫雙-2-硝基苯甲酸分光光度測定法 李前; 孫曼霽 第七屆全國生化藥理學術討論會論文摘要集 2000-07-01 中國會議