促腎上腺皮質素合成

方法一、酸丙酮提取法。

　　腺垂體干粉的制備將新鮮豬腦垂體迅速投入丙酮中，浸泡脫水三次，每次24h，至腦垂體為粉紅色變硬為止。將腺垂體、神經垂體嚴格分離，分別貯存于丙酮中。否則腺垂體中含有神經垂體時會使加壓素超限。制備時將腺垂體取出干燥、磨粉、過40-60目篩，得腺垂體干粉(水分應低于6%)。

　　豬腦垂體[丙酮]→腺垂體[干燥、磨粉]→腺垂體干粉

　　促皮質素的提取在腺垂體粉10kg中加入丙酮調成糊狀，再加入丙酮總量為84L，攪拌下加入36L的1mol/L鹽酸，于50℃維持30min，速降溫至30℃以下過濾，濾液用冰冷卻到約4℃。濾渣用28L丙酮和12L的0.1mol/L鹽酸，再重復提取一次，過濾。合并兩次濾液，溫度約為4℃時，反復過濾至澄清。

　　腺垂體干粉[丙炯，HCl]→[50℃, 30min]促皮質素的提取[過濾]→[4℃]濾液

　　促皮質素成品的制備按體積加入0.3%的5mol/L氯化鈉液，攪勻，加入8-10倍量丙酮，攪拌10min后放置5min。去除丙酮清液，用3號垂熔漏斗過濾沉淀，再分別用丙酮和無水乙醚各洗2次，真空干燥，即得促皮質素成品。

　　濾液[NaCl, 丙酮]→[真空干燥]促皮質素成品

方法二、交聯羧甲基纖維素(CMC)精制法

　　腺垂體的提取取腺垂體干粉1kg，加入20L的0.5mol/L醋酸(先預熱到50℃)，攪拌，緩慢滴加約100ml的50%硫酸，調pH2-2.4，升溫到70-75℃，維持10min，速冷至20℃以下，加入用0.5mol/L醋酸浸泡過夜的硅藻土約400-600g，過濾，濾液冷藏。濾渣再同法處理一次(0.5mol/L醋酸15L，50%硫酸20ml，硅藻土200g)。殘渣再用0.5mol/L醋酸2L洗滌，過濾。合并3次濾液，用10%氫氧化鈉液調pH為3.1-3.4，先后分別用布氏漏斗、4號垂熔漏斗過濾至澄清，濾液冷藏過夜。

　　腺垂體干粉[HAc, H2SO4]→[pH2-2.4, 70-75℃]腺垂體提取液[NaOH]→[pH3.1-3.4]濾液

　　吸附、洗脫將冷藏濾液調pH3.1后，加入40ml聚山梨酯80和200g交聯CMC，在3℃攪拌下吸附12h，冷藏過夜。然后吸去上清液，沉淀用3號垂熔漏斗過濾，收集CMC，先后用0.1mol/L醋酸10L和蒸餾水10L，各分3次洗滌CMC，在15℃左右抽干，再用800ml的0.15mol/L鹽酸洗脫1次。合并濾液，加入717或ZeroliFF陰離子交換樹脂約2000g，立即調pH為3以上，過濾，樹脂用1L的0.1mol/L醋酸洗滌，濾液合并，用0.5mol/L鹽酸或氫氧化鈉調pH為3.1，冷藏過夜。

　　腺垂體濾液[CMC, pH3.1]→[3℃,12h]吸附物[HAc,蒸餾水，HCl]→[pH3.1,15℃]洗脫液

　　二次吸附、洗脫將冷藏洗脫液中加入10-12ml聚山梨酯80，攪勻后加入30gCMC，在1-5℃攪拌吸附12h，冷藏過夜。次日吸去2/3的上清液，留下1/3用4號垂熔漏斗過濾，收集CMC，分別用0.1mol/L醋酸4L和蒸餾水4L，各洗滌2次，抽干，加入pH4.8的0.01mol/L醋酸銨溶液1.3L，在15℃以下攪拌15min，過濾抽干，蒸餾水1.2L洗1次，再加pH6.7的0.1mol/L醋酸銨溶液1.3L，于10-15℃攪拌15min，過濾后用3L蒸餾水分2次洗滌，抽干。用0.15mol/L鹽酸1L于25℃攪拌洗脫1.5h，過濾，用160ml的0.15mol/L鹽酸洗CMC1次，洗液并入洗脫液中。

　　洗脫液[CMC]→[1-5℃,12h]吸附物[HAc, 蒸餾水，醋酸銨]→[10-15℃]吸附物[HCl, 25℃]→洗脫液

　　促皮質素的精制加人717或ZerolitFF陰離子交換樹脂約300g，調節pH為4左右，過濾。用0.1mol/L醋酸150ml洗樹脂1次，洗滌液與濾液合并，加732陽離子交換樹脂約84g，pH調回到3左右，過濾，用0.1mol/L醋酸50ml洗樹脂1次，洗滌液并入濾液中，冷凍干燥，即得精制促皮質素。

　　洗脫液[陰、陽離子交換樹脂]→[凍干]精制促皮質素。