丁基鋰在用前必須標定，雙滴定法比較繁瑣，一般不用，可用單滴定法滴定。具體方法如下：

1）滴定試劑：1mol/L的仲丁醇/二甲苯溶液（仲丁醇和二甲苯均須用活化過的5A分子篩干燥）

2）指示劑：2,2'-聯二吡啶3）溶劑：二甲苯（須用活化過的5A分子篩干燥）

4）操作方法：在氬氣保護下，往帶一個翻口塞的100ml的三口瓶中加入磁子，20ml二甲苯，很少量指示劑，然后用一個帶精確刻度2ml注射器準確量取2ml丁基鋰快速轉移到瓶中（注射器中的空氣需要用氬氣置換，且抽取丁基鋰時需排除針筒中的氬氣，并在丁基鋰溶液中來回抽排幾次，以免針筒中微量的水和空氣影響滴定的準確度），體系變為紫紅色，然后將同一個針筒（用同一個針筒的目的是為了減小滴定誤差）洗干凈，吹干，用滴定劑洗滌兩至三次，準確量取滴定劑滴定之體系突變為黃色，此為滴定終點。

5）重復滴定一次，兩次誤差在2%以內，則可認為結果準確。

6）滴定結果：滴定劑量(ml)/2即為丁基鋰的摩爾濃度

注意事項：

1）正丁基鋰遇空氣極易自燃，量取時，針頭尖端在空氣中會冒火星。

2）整個過程中須用氬氣保護，特別需要注意安全。

3）丁基鋰著火時，須用沙土滅火。平時須在伸手可及的地方備有滅火的沙土。

4）制備和使用丁基鋰時，最好不要一個人單獨操作，以免有意外情況時，一個人無法處理。