附錄 A
乙基麥芽酚、乙基香蘭素含量的測定
A.1 原理
以無水乙醇提取飼料香味劑中乙基香蘭素、乙基麥芽酚，提取液過濾膜后用配有氫火焰檢測器和5%苯基-甲基聚硅氧烷毛細管氣相色譜柱的氣相色譜儀測定。
A.2 試劑和溶液
本方法所用試劑和水，未注明其要求時，均指分析純和符合GB/T 6682中規定的三級水。色譜分析中所用水均為符合GB/T 6682中規定的一級用水。
A.2.1 無水乙醇。
A.2.2 乙基香蘭素標準品：含量≥98%。
A.2.3 乙基麥芽酚標準品：含量≥98%。
A.2.4 乙基香蘭素標準品溶液：稱取乙基香蘭素標準品0.1g（精確至0.0001g），置于10mL棕色容量瓶
中，無水乙醇溶解，定容至刻度，搖勻。使乙基香蘭素濃度為10mg/mL，2～8℃保質期一個月。
A.2.5 乙基麥芽酚標準品溶液：稱取乙基麥芽酚標準品0.1g（精確至0.0001g），置于10mL棕色容量瓶
中，無水乙醇溶解，定容至刻度，搖勻。使乙基麥芽酚濃度為10mg/mL，2～8℃保質期一個月。
A.2.6
A.3 儀器和設備
A.3.1 氣相色譜儀：配氫火焰檢測器和程序升溫的柱溫箱。
A.3.2 有機相針式濾器：孔徑0.45μm。
A.3.3 分析天平:感量為0.0001g。
A.3.4 實驗室常用儀器設備。
A.4 測定
A.4.1 氣相色譜參考條件
色譜柱：5﹪苯基-甲基聚硅氧烷毛細管氣相色譜柱或同等效果的柱子，30 m×0.25 μm；
進樣口溫度：240℃
進樣方式：不分流進樣；
進樣體積：1 µL；
載氣流速：8.0 mL/min；
柱溫箱溫度：起始 60 ℃，保持 2min，以 30 ℃/min 的速率升溫至 200 ℃，保持 2 min；
檢測器溫度：260 ℃。
A.4.2 試樣溶液的制備
準確稱取試樣約0.5g （精確至0.0001g），置于10 mL棕色容量瓶中，加5 mL無水乙醇，振蕩混勻，用無水乙醇定容至刻度。混勻后靜置。取上清溶液，過0.45 µm的微孔濾膜，盡快上機測定。
A.4.3 色譜分析
按氣相色譜儀說明書調整儀器操作參數。向氣相色譜柱中注入乙基香蘭素、乙基麥芽酚標準品溶液及試樣溶液， 得到色譜峰面積響應值。
A.4.4 結果計算
試樣中乙基麥芽酚、乙基香蘭素含量以質量分數X計，數值以（％）表示，按式（A.1）計算：
        A1×C1×10
X=-------------------100...........................(A.1)
           m×A2
式中：
A1 — 試樣溶液峰面積值；
C1 — 標準樣品的濃度，單位為克每毫升（mg/mL)；
A2 — 標準品溶液峰面積值；
m — 樣品的質量，單位為克（mg)；
每個試樣取兩個平行樣進行測定，以其算術平均值為結果，結果保留三位有效數字。
A.5 允許差
兩個平行測定結果相對偏差不大于 5.0％。



1．性狀
本品是白~淡黃色的磷片結晶或結晶性粉末，有草香醛樣的香味①。
2．鑒定試驗
（1）取本品0.1g，加1mL25%鹽酸，在水浴上加熱5min，冷卻后添加過氧化氫試液1mL，充分混合振蕩3min，放置生成沉淀后，再加苯2mL，振蕩混合，苯層呈天藍色②。
（2）按“草蘭素”的鑒定試驗（2）和（3）。
3．純度試驗
（1）熔點  本品的熔點應是76~78℃。
（2）溶解性  將本品1g溶于60V/V%乙醇10mL時，溶液應透明。
4．干燥失重
將本品用于燥器（硫酸）干燥4h，失重應在0.5%以下。
5．強熱殘留物
本品的強熱殘留物應在0.05%以下。
6.含量分析
將試樣在五氧化磷中干燥4h后，準確稱取該試樣約300 mg，放人一125 ml圓錐燒瓶中，溶于50ml二甲基甲胺中。加百里酚藍試液(TS-247)3滴，在磁力攪拌和預防大氣中二氧化碳的措施下，用0.1 mol/L甲醇鈉進行滴定。同時作空白試驗。每Ml 0.1mol/L甲醇鈉相當于乙基香蘭素(C9H10O3)16.62 mg。
注  解
①本品有類似于草蘭素的香味。強度相當于草香醛的2~2.5倍。本品1g溶于100mL水中（50℃），易溶于乙醇、乙醚、氯仿，氫氧化鈉等堿溶液中，遇光和空氣緩慢氧化。
②在本品中加25%鹽酸，即使加熱也不能完全溶解，而草蘭素在此條件下可完全溶解。冷后，加氧化氫，溶液呈黑褐色，且生成沉淀。向其中加苯溶解，苯層變成美麗的天藍色。草香醛時，呈鈉色，反應機制不明。