化妝品中馬來酸二乙酯的檢測方法
1 適用范圍
本方法規定了化妝品中馬來酸二乙酯（CAS號：141-05-9）含量的高效液相色譜(HPLC)測定方法和陽性結果確證方法。
本方法適用于乳（霜）、指甲油、香水等化妝品中馬來酸二乙酯含量的測定。
2 方法提要
試樣在60℃水浴經乙腈超聲提取后，過0.45 mm濾膜，采用高效液相色譜系統分離，紫外檢測器或二極管陣列檢測器進行檢測，以外標法定量。本方法的檢出限為5.0 μg，定量下限為15.0 μg。若取5.0 g樣品，本方法對馬來酸二乙酯的檢出濃度為1.0 mg/kg，定量濃度為3.0 mg/kg。
3試劑和材料
除另有規定外，所用試劑均為色譜純，水為一級水。
3.1乙腈。
3.2 馬來酸二乙酯標準物質：純度≥95%。
3.3 馬來酸二乙酯標準儲備液（1.0 mg/mL）：準確稱取馬來酸二乙酯標準物質(3.2)0.1 g（精確至0.1 mg）于100 mL容量瓶中，乙腈（3.1）稀釋定容。
3.4 馬來酸二乙酯系列標準溶液：分別移取標準儲備液（3.3）0.0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 mL于6個100 mL容量瓶中，乙腈（3.1）稀釋定容，配制成濃度為0.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0 mg/L的系列標準溶液。
4儀器與設備
4.1 高效液相色譜儀：配紫外檢測器或二極管陣列檢測器。
4.2 液相色譜-三重四極桿串聯質譜儀：配電噴霧離子源。
4.3 分析天平：感量分別為0.1 mg和1.0 mg。
4.4 超聲清洗器。
4.5 渦旋混勻器。
4.6 有機微孔濾膜：0.45 μm。
4.7 具塞比色管，25 mL。
5分析步驟
5.1 樣品預處理
稱取試樣5.0 g（精確至1 mg）于25 mL比色管中，加入20.0 mL乙腈（3.1），在渦旋混勻器上高速振蕩5min。然后在60℃水浴中超聲提取30min，靜置至20℃（±5℃），用乙腈（3.1）定容至刻線，搖勻，過0.45 mm濾膜，待測。
5.2色譜參考條件
色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，250 mm×4.6 mm（內徑），5 μm；或相當者。
流動相：A相（乙腈）+B相（水）=40+60，等度洗脫。
流速：1.0 mL/min。
柱溫：30℃。
進樣量：10 mL。
檢測波長：220 nm。
5.3 校準曲線的制備
在5.2色譜條件下，分別取系列濃度的標準溶液（3.4）進行液相色譜測定，以標準溶液濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制校準曲線。
5.4 測定
取待測溶液10 mL注入高效液相色譜儀，根據峰的保留時間和紫外吸收光譜圖定性，根據峰面積從曲線上查出待測溶液中馬來酸二乙酯的質量濃度，從而計算樣品中馬來酸二乙酯的含量。
6 計算
試樣中馬來酸二乙酯的含量（mg/kg），按式（1）計算：
式中：w ——試樣中馬來酸二乙酯的質量分數，mg/kg；
m ——稱取試樣的質量，g；
r ——上機溶液濃度，mg/mL；
V ——試樣定容體積，mL；
D ——稀釋倍數。
7 回收率和精密度
多家實驗室驗證的平均回收率為89.2%～100.4%，相對標準偏差小于5%（n=6）。
8 質譜確證
如檢出陽性樣品，需經液相色譜-三重四級桿串聯質譜法進行陽性確證。
8.1 前處理過程見5.1
8.2色譜參考條件
色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱色譜柱（150 mm×2.1 mm，3.5 μm),或相當者；
流動相：乙腈+水（V:V=75:25）；
流速：0.3 mL/min；
柱溫：30℃；
進樣量：2 mL。
8.3質譜參考條件
離子源：電噴霧離子源（ESI）；
掃描方式：正離子掃描；
監測方式：多反應監測模式（MRM）；
干燥氣：N2；
離子源溫度：120℃；
干燥氣溫度：350℃；
干燥氣流速：12 L/min。
表1 母離子、特征碎片離子、裂解電壓及碰撞能
|
母離子（m/z） |
碎片離子（m/z） |
裂解電壓（V） |
碰撞能(V) |
|
173 |
127 |
70 |
5 |
|
99 |
70 |
5 |
表2 馬來酸二乙酯的定性離子
|
名稱 |
定性離子對 |
定量離子對 |
豐度比 |
|
馬來酸二乙酯 |
173.0>127.0 |
173.0>99.0 |
83.3% |
|
173.0>99.0* |
8.4定性測定
在相同的實驗條件下，樣液中被測物的色譜峰保留時間與標準工作液相同，并且在扣除背景后的樣液譜圖中，所選擇的離子對均出現，各定性離子的相對豐度與標準品離子的相對豐度相比，偏差不超過表2規定范圍內，則可判斷樣品中存在對應的被測物。
表3 定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差
|
相對離子豐度 |
>50% |
20%～50% |
10%～20% |
≤10% |
|
允許的相對偏差 |
±20% |
±25% |
±30% |
±50% |
8.5 檢出限
本方法對馬來酸二乙酯的檢出濃度為1.0 mg/kg。
9 色譜圖
圖1 馬來酸二乙酯標準溶液的高效液相色譜圖
（馬來酸二乙酯：4.736 min）
圖2 馬來酸二乙酯標準溶液的HPLC-MS/MS色譜圖
【作者】田愛萍
【機構】杭州大自然有機化工實業有限公司,浙江杭州310011
【摘要】論述了高效液相色譜法測定馬來酸二乙酯含量的方法。本方法的標準偏差為0．24。變異系數為0．29％，平均回收率為100．1％。
【關鍵詞】馬來酸二乙酯 高效液相色譜