在自然界，丁二酮廣泛存在于多種植物的香精油中，如鳶尾油、當歸油、月桂油等，是黃油和其他一些天然產物香味的主要成分。

     工業上生產丁二酮是將甲基乙基酮用亞硝酸處理，生成丁酮肟，再用稀硫酸分解而得。或用乙烯基乙炔或甲基乙烯基酮經水合再氧化的方法。實驗室可用二氧化硒氧化丁酮制取，也有用二酮二肟與亞硝酸鈉反應的方法。

       可從含量高的精油中用游離法制得：精油1份加2份磷酸，使生成結晶性加成物C4H6O2?2H3PO4，加水后即釋出丁二酮，如磷酸加入過量則加成物為液體。

      由葡萄糖經特殊發酵獲得。

      用甲乙酮為起始原料合成。

將丁酮在鹽酸存在下用亞硝酸鈉氧化后，用硫酸水解后蒸餾而得。