方法一、鈣鹽間接提取法鈣鹽的制備新鮮豬膽汁，在攪拌下加3-3.5倍量飽和石灰水上清液，加完后繼續攪拌5-10min，Ph11-12，加熱至50℃時出現的泡沫用紗布除去，繼續加熱至沸，保持2min，冷卻，過濾，得鈣鹽。膽紅素成品的制備取鈣鹽加0.8倍量水調成糊狀，過30-40目篩，濾液中加0.3%抗氧化劑，加鹽酸調pH1.5，靜置4h，過濾，濾餅加8-10倍量80%乙醇搗碎混勻，加抗氧化劑，靜置過夜，得沉淀物。加4-6倍量80%以上的乙醇和抗氧化劑，攪拌后浸泡過夜，如此操作3-4次，將沉淀物70℃以下干燥，得膽紅素成品。鈣鹽沉淀[HCl,偏重亞硫酸鈉]→沉淀[乙醇，偏重亞硫酸鈉]→沉淀物[70℃]→膽紅素成品。
方法二、改進的鈣鹽-氯仿提取法膽紅素鈣鹽的制備新鮮豬膽汁加氫氧化鈉調pH12，加熱至沸，加氯化鈣溶液，再加熱至沸，冷卻，過濾，得膽紅素鈣鹽。豬膽汁[NaOH,CaCl2]→[pH12,100℃]膽紅素鈣鹽膽紅素成品的制備膽紅素鈣鹽加1：1鹽酸調pH1-2，瀝去酸水，加氯仿提取，再蒸去氯仿，加無水乙醇洗滌，溶液放置約5℃，得膽紅素成品。膽紅素鈣鹽[HCl]→[pH1-2]酸化物[氯仿，無水乙醇]→[5℃]膽紅素成品。
方法三、改進的鈣鹽法制鈣鹽，酸化取新鮮豬膽汁加1%氫氧化鈣，攪勻，迅速加熱至90-97℃，保溫10min，過濾得鈣鹽。加熱至40℃即出現油脂物可輕輕除去。所得鈣鹽可用熱水沖洗一次，除去過量的堿和其他雜質。取鈣鹽加10倍量以上水使均勻分散，加1%抗氧化劑，攪拌下(60r/min)滴加1：2鹽酸。40min內達pH2.0，pH不變為止，得酸化物。
豬膽汁[1%氫氧化鈣]→[90-97℃，15min]膽鈣鹽[抗氧劑，鹽酸]→[pH2,40min]酸化物醇洗，水洗酸化膽紅素室溫下加10倍量乙醇，使其分散均勻，pH不應高于5，加0.5%抗氧化劑，攪勻放置約1h分層。去上層醇液，收集沉淀膽紅素。取醇洗膽紅素加50℃溫水沖洗，保溫約5min，收集漂浮膽紅素，迅速加乙醇脫水，除去乙醇得膽紅素粗品。
酸化物[乙醇]→[1h]沉淀膽紅素[50℃熱水]→[乙醇]膽紅素粗品提取，蒸發，結晶和干燥取膽紅素粗品加10倍氯仿50℃振搖溶解10min。必要時可提取2-3次，殘渣為白色即可。將氯仿提取液減壓蒸餾近干，出現大部分膽紅素結晶，冷至室溫后加入乙醇，繼續冷卻至4℃10min，濾出膽紅素結晶，用無水乙醇或乙醚處理后，真空干燥得膽紅素精品。
膽紅素粗品[氯仿]→[10min]氯仿溶液[結晶]→膽紅素精品
方法四、離子交換樹脂提取法水解液的制Chemicalbook備取新鮮牛膽汁，紗布過濾，在攪拌下加2mol/L氫氧化鈉溶液調pH10，攪拌下煮沸，過濾，得水解液。牛膽汁[NaOH]→[pH10,100℃]水解液樹脂柱吸附、洗脫膽酸將煮沸的水解液倒入已預熱的樹脂柱中，至流出液色變深，吸附飽和為止。加入冷水至柱內溫度降至室溫，再從柱上端加入稀鹽酸亞硫酸氫鈉溶液，使流出液pH為1。用75%乙醇洗脫，洗脫液為墨綠色渾濁液時收集，洗脫至流出液變清，pH近中性。再用95%乙醇洗1次。收集的乙醇洗脫液供制備膽酸。水解液[離子交換柱]→[75%乙醇，95%乙醇]乙醇洗脫液洗脫膽紅素、濃縮和干燥將柱內95%乙醇全部放出，加氯仿浸泡10min，收集氯仿洗脫液至不顯黃色為止。將氯仿洗脫液蒸餾近干，加無水乙醇，繼續回收至無氯仿，趁熱抽濾，收集膽紅素，干燥，得膽紅素成品。樹脂柱[氯仿]→氯仿洗脫液[蒸發，干燥]→膽紅素成品。
方法五、有機溶劑直接萃取法破膽新鮮或冷凍豬膽化凍后，用不銹鋼刀破開膽皮，再用一層白的確涼過濾膽汁以除去油脂和雜質，得純膽汁。豬膽[過濾]→豬膽汁氯仿提取100ml膽汁加0.5ml氯仿，邊加邊攪拌，加熱至50-70℃，加4%氫氧化鈉溶液，調pH11-12。再加熱至98-100℃，沸騰3min，降溫至20-30℃。加亞硫酸氫鈉，加氯仿，加鹽酸，調pH3-4，分層，上層為水層，中層為雜質和膽酸，下層為膽紅素氯仿溶液。豬膽汁[氯仿，4%NaOH]→[100℃,20-30℃][酸化]→膽紅素氯仿溶液膽紅素成品取膽紅素氯仿溶液，加熱回收氯仿，溫度<80℃。加無水乙醇繼續蒸餾至殘余氯仿蒸干，抽濾至干，用50-70℃熱乙醇洗一次抽干，加乙醚沖洗抽干。放入干燥器或約40℃烤箱干燥，得膽紅素成品。膽紅素氯仿溶液[濃縮，干燥]→膽紅素成品。
方法六、以膽綠素為原料膽綠素還原酶的制備從豬腎中分離純化制備膽綠素還原酶。豬腎[分離]→膽綠素還原酶膽紅素成品的制備將膽綠素用膽綠素還原酶還原，或將膽綠素加抗氧劑處理，制得膽紅素成品。膽綠素[膽綠素還原酶]→膽紅素成品方法七、以膽汁為原料堿水解量取新鮮膽汁(經雙層紗布過濾)1000ml，加少量固體亞硫酸氫鈉及5ml氯仿，加熱至60-70℃。不斷攪拌下冷至50℃時加0.2%的亞硫酸氫鈉溶液，加2mol/L氫氧化鈉溶液調pH11-12，不斷攪拌下加熱沸騰3min，降至室溫，得堿水解液。新鮮膽汁[NaHSO3,氯仿]→[60-70℃][0.2%NaHSO3]→[50℃][pH11-12]→[沸騰3min][室溫]→堿水解液氯仿萃取堿水解液中加0.1%亞硫酸氫鈉溶液和30%氯仿。