D－蘋果酸

1 范圍
本標準規定了 D－蘋果酸的要求、試驗方法、檢驗規則及標志、包裝、運輸、貯運。
本標準適用于以酶工程法制得的 D－蘋果酸。
化學名稱： D－羥基丁二酸
分子式： C4H6O5
相對分子質量：134.09 (按 2007 年國際相對原子質量計)

2 規范性引用文件
下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的應用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。
GB/T 601—2002 化學試劑 標準滴定溶液的制備
GB/T 602—2002 化學試劑 雜質測定用標準溶液的制備
GB/T 603—2002 化學試劑 試驗方法中所用制劑及制品的制備
GB/T 613—2006 化學試劑 比旋光本領(比旋光度)測定通用方法
GB/T 66792-2003 固體化工產品采樣通則
GB/T 6682—2008 分析實驗室用水規格和試驗方法
GB/T 9728－2007 化學試劑 硫酸鹽測定通用方法
GB/T 9729－2007 化學試劑 氯化物測定通用方法
GB/T 9741—2008 化學試劑 灼燒殘渣測定通用方法
GB 191—2008 包裝儲運圖示標識
JJF 1070-2005 定量包裝商品凈含量計量檢驗規則
2005 年國家技術監督局 75 號令 定量包裝商品計量監督管理辦法

3 要求
3.1 外觀形狀
本品為白色結晶或結晶粉末，無臭或稍帶特殊氣味，有特異的酸味。
3.2 理化指標
D－蘋果酸理化指標應符合表1要求
3.3 凈含量及允許偏差
凈含量及允許偏差應符合《定量包裝商品計量監督管理辦法》的規定。
表 1 理化指標
項 目               指 標
含 量(以C4H6O5計)，w/% ≥ 99.0
澄清度                 合格
氯化物(以Cl計), w/% ≤ 0.004
灼燒殘渣, w/%       ≤ 0.1%
比旋光度[20℃]Dº  +1.6~+2.6
硫酸鹽(SO4計), w/%  ≤ 0.03
富馬酸, w/%         ≤ 1.0
馬來酸, w/%         ≤ 0.05

4 試驗方法
4.1 試驗中所用的試劑、水的規格及溶液的制備
除特殊注明外，試驗中所用的試劑為均分析純試劑；試驗用水應符合 GBT6682 中三級水規格；試驗所需分析用標準溶液，雜質測定用標準溶液以及所用試劑及制品分別按 GBT601、GBT602、GBT603規定配制。
4.2 鑒別試驗
4.2.1 試劑和溶液
a） 氨試液：2+3（氨+水）；
b） 對氨基苯磺酸；
c） 亞硝酸鈉溶液：200g/L；
d） 氫氧化鈉溶液： 40g/L、400g/L；
e） 間苯二酚；
f） 硫酸。
4.2.2 分析步驟
稱取試樣 1.0g 溶于 20mL 水。搖勻后做以下試驗：
a）取上述試樣液 1mL 放入蒸發皿中，加氨試液中和后,加對氨基苯磺酸 10mg,水浴加熱數分鐘，再加亞硝酸鈉溶液 5mL，稍加熱后，滴加氫氧化鈉溶液(40g/L)成堿性時，應顯紅色。
b）取上述試樣液 1mL 放入試管中，加間苯二酚 2mg～3mg 及硫酸 1mL 搖勻，在 120℃～130℃下加熱 5min，冷卻后加水配至 5mL。將此溶液邊冷卻邊滴加氫氧化鈉溶液(400g/L)使成堿性,然后加水配至10mL,在紫外線燈光下應發出淡藍色的熒光。
4.3 含量測定
4.3.1 方法提要
在酚酞指示劑存在下，用已知濃度的堿標準溶液滴定試樣水溶液，測出試樣中總酸度(以 C4H6O5計)。
4.3.2 試劑和溶液
a) 氫氧化鈉標準滴定溶液：C(NaOH)=1.0 mol/L；
b) 酚酞指示液：10 g/L。
4.3.3 分析步驟
精確稱取試樣 2.0g（精確至 0.0002g），加煮沸過的冷卻水 40 mL，溶解后加 2 滴酚酞指示劑。用1.0mol/L 氫氧化鈉標準溶液滴定至微紅色，保持 30s 不褪色為終點，同時做空白試驗。
4.3.4 分析結果的表述
蘋果酸(以 C4H6O5計)的含量以質量百分數 x 計，數值以%表示，按式（1）計算：
        (V1-V2)×C×6.704
x=-------------------------……………………（1）
                 m
式中：
V1— 試樣消耗氫氧化鈉標準滴定溶液的體積，mL；
V2— 空白試驗消耗氫氧化鈉標準滴定溶液的體積，mL；
C — 氫氧化鈉標準滴定溶液的實際濃度，mol/L；
m —樣品的質量的數值，單位為克（g）；
M —蘋果酸的摩爾質量的數值,單位為克每摩爾(g/mol)(M=134.09)
4.4 澄清度試驗
4.4.1 試劑和溶液
a. 硝酸溶液：(1+2)；
b. 糊精溶液：20g/L；
c. 硝酸銀溶液：20g/L；
d. 鹽酸標準溶液：C(HCl)=0.1mol/L
4.4.2 標準比濁溶液的制備
4.4.2.1 1mg/ml 氯(Cl)溶液的制備。
準確量取鹽酸標準溶液 14.1mL，置于 50mL 容量瓶中加水稀釋至刻度。
4.4.2.2 0.01mg/ml 氯(Cl)溶液的制備。
準確量取 1mg/ml 氯(Cl)溶液 10mL，置于 1000mL 容量瓶中，加水稀釋至刻度。
4.4.2.3 澄明標準比濁溶液的制備
準確量取 0.01mg/ml 氯(Cl)溶液 0.2mL，加水配至 20mL。于該液中加硝酸溶液 1mL，糊精溶液 0.2mL及硝酸銀溶液 1mL，搖勻后，避光放置 15min。規定為澄明的溶液，應幾乎看不到有浮游等異物混入。
4.4.3 分析步驟
稱取試樣 1.0g 置于 50mL 比色管中，加水 20mL 振搖，溶解。 呈澄明溶液，其濁度不得大于標準比濁溶液所呈濁度。
4.5 氯化物（以 Cl 計）含量的測定
按GB/T9729的規定進行測定。測定時稱取 1.0g試樣，精確至0.01g， 試樣所呈濁度不得大于標準。
標準是取0.1mg/mL氯化物標準溶液0.4 mL，與試液同時同樣處理。
4.6 灼燒殘渣
按照 GB/T 9741 的規定進行。測定時稱取 5g 試樣,精確至 0.0002g，灼燒溫度為(800±50)℃。
4.7 比旋光度
稱取試樣 8.5g，精確至 0.001g，加水溶解后定容至 100mL，混勻。以下按 GB/T613 規定的方法進行。
4.8 硫酸鹽的測定
按GB/T 9728的規定進行測定。測定時稱取 1.0g試樣，精確至0.01g, 試樣所呈濁度不得大于標準。標準是取0.1mg/mL硫酸鹽標準溶液3 mL，與試液同時同樣處理。
4.9 富馬酸和馬來酸的測定
4.9.1 測定原理
利用高效液相色譜儀的高效分離作用，將樣品中的蘋果酸、馬來酸和富馬酸分別分離，通過紫外吸收檢測器檢測，待測物質的響應值在一定范圍內與其濃度呈線性關系；從而分別測定樣品中的富馬酸及馬來酸的含量。
4.9.2 儀器裝置
HPLC 配套裝置：waters-UV 紫外檢測器；
色譜柱： C8 250mm×4.6mm；
色譜工作站；
4.9.3 試劑和溶液
a） 流動相：0.1%磷酸-10%甲醇(v/v)水溶液；
b） 原標準溶液：準確稱取 20mg 富馬酸標準及 20mg 馬來酸標準,溶于適量水（必要時加入少量0.1mol/L NaOH）并轉移至 50mL 容量瓶，以流動相稀釋至 50.0mL；
c） 標準稀溶液制備：準確移取原標準溶液 1.0mL,置于 50mL 容量瓶，以流動相稀釋至 50.0mL，混勻。
4.9.4 色譜操作條件
流動相：0.1%磷酸-10%甲醇(v/v)水溶液；
流速： 1.0mL/min；
柱溫：35℃；
檢測波長：214nm；
進樣量：5μl；
定量方法：外標（面積）法
保留時間：
蘋果酸：3.6min
馬來酸：4.6min
富馬酸：6.1min
上述操作參數是典型的，可根據不同儀器特點，對給定的操作參數作適當調整，以期獲得最佳的效果。典型色譜圖見圖表 1 和 2。
4.9.5 分析操作
4.9.5.1 試樣處理
精確稱取 0.5 ～1.5g 樣品(準至 0.0002g), 置于 50mL 容量瓶，以流動相稀釋至 50.0mL，混勻。
4.9.5.2 分析結果的表述
分別取等體積脫氣后樣品液和標準稀溶液，進樣測定；記錄色譜圖，根據各組份的的響應值計算各組份的含量。
結果計算：

            Ru×Cs
x =--------------------- ………………………………………………… （2）
          200×Rs×m
式中：
x1— 樣品中富馬酸或馬來酸的含量,（ m/m） %；
Cs—標準稀溶液中富馬酸或馬來酸的濃度μg/mL；
Ru — 樣品液中待測物質的響應值；
Rs — 標準稀溶液中富馬酸或馬來酸的響應值；
m— 試樣質量，g。
4.10 凈含量
按 JJF1070 有關規定方法執行。

5 檢驗規則
產品應由公司質量監督檢驗部門進行檢驗，公司應保證所有出廠產品都符合本標準的要求。每批出廠的產品必須附有檢驗合格檢驗證明。
5.1 組批
本產品應以同批原料，同一生產條件下生產的均勻產品為一批，每批不大于 10 噸。
5.2 取樣方法：
按 GBT6679 有關規定進行。抽取不少于 100g 的樣品經充分混勻，以四分法取其中 50g，分裝于二只干燥、潔凈的樣本袋中，雙層壓膜封口貼上標簽，注明生產廠名、產品名稱、批號、取樣日期等，一瓶供檢驗用，一瓶供留樣備查。凈含量的抽樣方法按《定量包裝商品計量監督管理辦法》規定進行。
5.3 判定
如指標不符合本標準規定時，應重新自兩倍量的包裝件中采樣復驗。復驗結果即使有一項指標不符合本標準規定，則判該批產品為不合格品。

6 標志、包裝、運輸和貯存
6.1 標志
6.1.1 本產品外包裝應有如下內容的標志：
a）產品名稱、標準編號；
b）產品商標；
c）生產日期或生產批號；
d）生產廠名和廠址；
e）包裝凈重；
f）有效儲存期；
g）GB 191 規定的防雨標志；
6.1.2 出口產品標志按合同規定
6.2 包裝
本產品用內襯食品級的聚乙烯塑料袋的紙板圓桶包裝，每桶凈重 25kg，還可根據用戶需要進行包裝。產品內包裝應附有產品合格證明文件。
6.3 運輸
運輸時應遮篷，不得與有毒、異味、易污染、易吸濕的物品混運。防雨、防曬。
6.4 貯存
本產品具有易吸濕性，貯存時不得與有毒、異味、易污染、易吸濕的物品混放。產品應貯存在陰涼、干燥的庫房中，避免日曬。
本產品在規定的貯運條件下，自生產之日起有效貯存期為二十四個月。