吡唑-巴比妥酸分光光度法
1 應用范圍
1.1 本法適用于測定生活飲用水及其水源水中游離氰及部分絡合氰化物的含量。
1.2 本法最低檢測量為0.1μg。若取250ml水樣蒸餾測定， 則最低檢測濃度為0.002mg／L。
2 原理
水樣中氰化物經蒸餾后吸收于堿性溶液中，與氯胺T伐應生成氯化氰， 然后與吡唑－巴比妥酸生成紫色染料，比色定量。
3 儀器
3.1 500ml全玻璃蒸餾器。
3.2 25ml具塞比色管和50ml具塞比色管。
3.3 恒溫水浴。
9.4 分光光度計。
4 試劑
4.1 氰化物標準溶液：1.00ml含1.00mg氰化物（CN-）。同21.1.4.1。
4.2 氫氧化鈉溶液（0.25mol／L及0.025mol／L）。
4.3 0.5mol乙酸溶液：取3ml冰乙酸，用純水稀釋至100ml。
4.4 磷酸鹽緩沖液：稱取2.79g水磷酸二氫鉀（KH2PO4）和4.L4 g無水磷酸氫二鈉（ Na2HPO4），溶于純水中，并稀釋至1000ml。
4.5.0.1％酚酞溶液：同21.1.4.8。
4.6 1 ％氯胺T溶液：同21.1.4.11。
4.7 吡唑－巴比妥酸試劑：稱取0 . 36 g巴比妥酸（丙二酰脲， C4H4O3H2），加入6ml吡啶（C5H5N）及20ml 1＋ 3 鹽酸， 待溶解后加純水稀釋至100ml。
5 步驟
5.1 取250ml水樣，按21.1.5.1步驟進行蒸餾，取10.0ml 蒸餾液，置于25ml比色管中。
5.2 另取25ml具塞比色管9支，分別加入氰化鉀標準溶液（4.1）0、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50及2.00ml，加0. 025mol／L氫氧化鈉溶液（4.2）至10.0ml。
5.3 向水樣及標準管中各加1滴酚酞指示劑，用0.5mol／L乙酸溶液（4.3）調至紅色剛好消失。
注：氯化氰的形成與pH值有關，溶液酸性時氰化物不穩定；堿性時活性氯形成的次氯酸鹽能分解氰化物，實驗證明，在加氯胺T前溶液的pH值在5～7 之間為宜。
5.4 向水樣及標準系列管中各加5.0ml磷酸鹽緩沖溶液（4.4），混勻。加入0.25ml氯胺T溶液（2L.2.4.6），混勻。加入2.5ml 吡唑－巴比妥酸試劑（4.7），混勻。加蒸餾水到25ml刻度，充分混勻。
5.5 將上述比色管中于40℃水浴中放置30min， 取出， 冷至室溫， 于585nm波長下，用3 cm比色皿，以純水作參比，測定吸光度。氯化物與吡啶-巴比妥酸反應達到穩定的最大吸光度時間與溶液溫度有關，35～40℃后時需2Omin；25 ～30℃需30min； 6～10℃需60min。
5.6 繪制校準弗線，從曲線上查出樣品管中氯化物含量。
6計算
C＝M/V1×V2/V3 ...............................(53)
式中：C───水樣中氰化物（CN-）濃度，mg／L；
M───從校準曲線上查得樣品管中氰化物的含量，μg
V1───最初水樣體積，ml；
V2───蒸餾液總體積，ml；
V3───色所用蒸餾液體積，ml。