精確稱取預經在硅膠上干燥4h后的試樣300mg，溶于20ml冰醋酸中，必要時略微加熱以助溶。加100ml苯和2滴結晶紫試液(TS-74)后，用0.1mol/L高氯酸滴定。同時進行空白試驗并作必要修正。每Ml0.1mol/L高氯酸相當于煙酰胺(C6H6N2O)12.21mg。
或用高壓液相色譜法(GT-10-4)測定。
儀器設備
儀器設備： 可見分光光度計 試樣制備： 1. 供試品溶液的制備
取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于煙酰胺60mg），置100ml容量瓶中，加鹽酸（9→1000）溶液75ml，置水浴上加熱15分鐘并實施振搖使溶解，放冷至室溫，用鹽酸（9→1000）溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液5ml置200ml量瓶中，用鹽酸（9→1000）溶液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。
注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。
應用范圍
本方法采用分光光度法測定煙酰胺片中煙酰胺的含量。
本方法適用于煙酰胺片。
方法原理
取本品適量，加鹽酸（9→1000）溶液加熱使煙酰胺溶解，并加鹽酸（9→1000）溶液定量稀釋，搖勻，照紫外-可見分光光度法，在261nm波長處，測定吸光度，按c6h6n2o的吸收系數（e1%1cm）為430計算，即得。
試劑
鹽酸（9→1000）溶液
試樣制備
1. 供試品溶液的制備
取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于煙酰胺60mg），置100ml容量瓶中，加鹽酸（9→1000）溶液75ml，置水浴上加熱15分鐘并實施振搖使溶解，放冷至室溫，用鹽酸（9→1000）溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液5ml置200ml量瓶中，用鹽酸（9→1000）溶液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。
注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟
精密量取上述供試品溶液，照紫外-可見分光光度法，在261NM波長處，測定吸光度，按c6h6n2o的吸收系數（e1%1cm）為430計算，即得。