四氮唑比色法。皮質激素類的C17位的α-醇酮基具有還原性．在強堿性溶液中能將四氮唑鹽定量地還原為有色甲噆(formazan)，后者在可見光區有最大吸收。

1、原理。該反應在一定條件下可定量完成，且生成的有色甲臜具有一定的穩定性，可用于甾體激素類藥物的含量測定。

2、最常用的四氮唑鹽有兩種。
(1)2,3,5-三苯基氮化四氮唑(2,3,5-triphenyltetramlium chloride，縮寫為TTC)，簡稱為氯化三苯四氮唑或紅四氮唑(red tetramline，RT)，其還原產物為不溶于水的深紅色三苯甲簪，在480~490nm波長處有最大吸收。氯化三苯四氮唑顯色靈敏度較低，但空白吸收較小。
(2)藍四氮唑(blue tetramline，BT)，即3,3’-二甲氧苯基-雙4,4’-(3,5-二苯基)氮化四氮唑{3,3’-dianisole-bis[4,4’-(3，5-diphenyl)tetramlium chloride]}，其還原產物為暗藍色的雙甲簪，在525nm波長處有最大吸收。

3、應用示例。
以中國藥典收載的醋酸氫化可的松軟膏的含量測定為例，測定方法如下：

a對照品溶液的制備
精密稱取醋酸氫化可的松對照品25mg，置100ml量瓶中，加無水乙醇適量使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得。

b供試品溶液的制備
精密稱取本品2.5g(相當于醋酸氫化可的松25mg)，置燒杯中，加無水乙醇約30ml，置水浴加熱使溶解，再置冰水中冷卻，濾過，濾液置100ml量瓶中，如此提取3次，濾液并入量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

c測定
精密量取對照品溶液與供試品溶液各1ml，分別置干燥具塞試管中，各精密加無水乙醇9ml與氯化三苯四氮唑試液(取氯化三苯四氮唑lg，加無水乙醇使溶解成200ml)lml，搖勻，再各精密加氫氧化四甲基銨試液(取10%氫氧化四甲基銨溶液lml，加無水乙醇使成10ml)1ml，搖勻，在25℃的暗處放置40~45分鐘，照分光光度法，在485nm的波長處分別測定吸收度，計算即得。